準備工作
在進行細胞取出前,首先需要準備好液氮罐和所需的工具。液氮罐應處于穩定的工作臺或地面上,確保罐體穩固不會傾斜或搖晃。同時,檢查液氮罐的液位,確保液氮足夠用于細胞取出過程。另外,準備好細胞取出所需的工具,包括長柄鑷子、無菌手套、小型達瓦瓶等。
細胞取出過程
1. 預先準備:在取出細胞之前,先將所需的培養基和培養皿放置在無菌工作臺上,使其保持在適當的溫度和濕度條件下。檢查培養基的質量和過期日期,確保培養基的有效性。
2. 打開液氮罐:小心打開液氮罐的蓋子,使用長柄鑷子輕輕夾住存放細胞的提桶,避免直接接觸液氮。在打開罐蓋時,注意保持周圍的環境安靜,避免突然的聲音或震動,以防止罐內液氮濺出。
3. 取出細胞:使用長柄鑷子將待取出的細胞罐從液氮罐中取出,放置在預先準備好的冰桶中。在取出過程中,要確保動作輕柔,避免罐子受到碰撞或振動,以防止細胞損傷或死亡。
4. 迅速轉移:將細胞罐迅速轉移到無菌工作臺上,立即將其浸入預先加熱的培養基中。迅速轉移細胞的目的是為了大限度地減少細胞暴露在液氮的時間,減少細胞受到冷凍傷害的風險。
細胞取出液氮罐是細胞凍存過程中的關鍵步驟之一,正確的操作可以保護細胞的完整性和生存率,確保實驗結果的準確性和可重復性。通過嚴格遵循標準的操作流程和安全注意事項,可以有效地進行細胞取出,并保障操作人員和實驗室環境的安全。
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